血液中酒精含量檢測氣相色譜法

 酒精的作用在醫(yī)學(xué)和法醫(yī)學(xué)上都很有意義。當(dāng)醫(yī)生需要知道酒精是否與病人的病情有關(guān)時，對血液或尿液中酒精的含量的估計就會起到相當(dāng)關(guān)健的作用。從法醫(yī)學(xué)的觀點來看，酒精含量在突然死亡、駕駛事故以及有關(guān)以喝醉酒作為防衛(wèi)性辯解等案件中是至關(guān)重要的。決定攝入酒后顯示出大乙醇濃度及量的時間的因素是：對象的體重、乙醇的量及濃度、攝入乙醇的方式、有無食物存在以及對象的身體狀況。

   酒精的影響對不同的人以及在不同時間的同一個體都是各不相同的。其作用主要取決于各人的所處的環(huán)境和體質(zhì)以及所飲酒精的稀釋情況。飲用同等量的酒精對習(xí)慣性飲酒者所造成的影響較偶爾飲酒者小得多。藥物有加強(qiáng)酒精效果的作用。

   很多案例表明，酒精與巴比土酸鹽類的協(xié)同作用是一些看似是自殺的死亡的一個原因，酒精本身可能是常見的中毒致死的原因。

   裝配有火焰離子化檢測器及Porapak Q柱的氣-固色譜技術(shù)在藥物制備中一直被用來鑒定和檢測乙醇、異丙醇以及丙酮。此項技術(shù)是用稀釋過的樣品的水溶液直接進(jìn)樣, 方法簡單而直接。

樣品制備 將兩份0.5毫升的異丁醇內(nèi)標(biāo)物 (濃度為10mg/ml水，其配制法為：用吸量管吸取12.4ml 異丁醇用水稀釋至1L ), 用吸量管分別吸入兩個不同的2-打蘭(7.4毫升)的殼型小瓶中, 一個標(biāo)為“已知”, 另一個標(biāo)為“未知”。取0.5ml乙醇作標(biāo)準(zhǔn)物 (濃度為50mg/100ml血液，其配制法為：吸5ml乙醇貯存液，再從血庫中取100ml血液加以稀釋；所用的乙醇貯存液的配制法為：用水將12.7 ml的無水乙醇稀釋至1升)，并將其轉(zhuǎn)移至一個標(biāo)為“已知”的小瓶中。吸量管用內(nèi)標(biāo)溶液洗滌三次。用一支10微升的亨氏注射器, 取0.5微升的已知樣和未知樣各兩份進(jìn)樣, 分別測量乙醇和異丁醇的峰高。

氣相色譜參數(shù) 使用一臺配有氫火焰檢測器的氣相色譜儀?；鹧骐x子化檢測器可用于檢測含水的樣品。柱子為不銹鋼材料(6英尺×0.25英寸外徑), 用30%聚乙二醇2萬固定相涂布在用酸洗過的60-80目的Chromosorb W 擔(dān)體上。柱子用氮氣作載氣于180°C下吹掃過葉。操作條件為：

爐溫 100或130°C

進(jìn)樣口溫度 160°C

氮氣流速 35ml/min

氫氣流速 28ml/min

氧氣流速 100ml/min

計算 用酒精和內(nèi)標(biāo)物的峰高進(jìn)行計算，可采用下式進(jìn)行計算：

式中： W₁ = 乙醇的毫克數(shù)

              W₂ = 100毫升的未知物

         C_s = 標(biāo)準(zhǔn)乙醇溶液的濃度（50mg/ml）

              h _x = 已知物中乙醇的峰高

              h_s = 未知物中內(nèi)標(biāo)物（異丁醇）的峰高

              R_x = 已知物中乙醇的峰高

              R_s = 已知樣中內(nèi)標(biāo)物（異丁醇）的峰高

討論

   圖 1 顯示了一份通過注射0.5微升血液-異丁醇內(nèi)標(biāo)混合物而獲得的典型的色譜圖。圖中各峰都被清楚地分開而且峰很尖銳。表1給出了一些常見的揮發(fā)性化合物的保留時間和相對保留時間，這些揮發(fā)性化合物都與酒精的攝取、糖尿病及嗜好嗅粘接劑中的有機(jī)溶劑味等病有關(guān)。。

   操作參數(shù)如柱溫或載氣流速并不是確定不變的，它們可隨所研究的化合物的類型及所用氣相色譜儀的性質(zhì)不同而改變。

   其它填料也可用于該測定，包括Hallcomid M 180L 涂布在Chromosorb W 80-100 目的擔(dān)體上或Porapark Q 80-100 目的填料。Porapak 有不同的特性但它的優(yōu)點是它是一種無需涂層的填料。

   注入系統(tǒng)的血液進(jìn)入進(jìn)樣口并在那里被捕集，而揮發(fā)物被載氣帶入柱中。在柱中進(jìn)樣將會堵塞柱子。所以，如果使用一個長的進(jìn)樣口，將有利于多次進(jìn)樣并能延長使用周期。使用六至八個月后，應(yīng)將進(jìn)樣口拆開并除去被捕集在此的血液，若有必要，可用水清洗。儀器應(yīng)在被再次使用前穩(wěn)定一夜。

   根據(jù)峰高進(jìn)行定量測定是令人滿意的，但是，若所獲得的峰太寬或不對稱，也可根據(jù)峰面積進(jìn)行定量。

表 1 一些化合物的保留值

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